«Наша цель состояла в том, чтобы идентифицировать микроРНК (miRNAs), которые могут помочь в дифференциальной диагностике MPM от RMP», — говорит ведущий исследователь Эрик Сантони-Ругиу, доктор медицинских наук, из лаборатории молекулярной патологии отделения патологии Rigshospitalet, Копенгаген. Университетская больница, Копенгаген, Дания. miRNA, которые представляют собой небольшие некодирующие цепи РНК, состоящие примерно из 22 нуклеотидов, оказались потенциальными диагностическими, прогностическими и прогностическими маркерами при других видах рака.
После скрининга 742 miRNA исследователи определили miR-126, miR-143, miR-145 и miR-652 в качестве лучших кандидатов для диагностики MPM. Используя результаты этих четырех микроРНК, образцы тканей от пациентов с известными исходами могут быть классифицированы как MPM или незлокачественные с точностью до 0.94, чувствительность 0.95, а специфичность 0.93.
Кроме того, может быть установлена связь между уровнями miRNA и выживаемостью пациентов.
«Международная группа по интересам мезотелиомы (IMIG) рекомендует, чтобы диагностический маркер MPM имел чувствительность / специфичность> 0.80, и этим критериям соответствует наш классификатор miRNA », — комментирует Dr.
Сантони-Ругиу. Авторы предполагают, что диагностическую точность можно еще больше повысить, добавив иммуногистохимическое тестирование мишеней miRNA в биопсийной ткани к их анализу miRNA.
Этот комбинированный анализ может позволить анализ образцов с низким количеством опухолевых клеток.
MPM, который связан с долгосрочным воздействием асбеста, представляет собой агрессивный рак, происходящий из мезотелиальных клеток, выстилающих мембрану, окружающую каждое легкое, известной как плевра.
Отличить МПМ от доброкачественных аномалий, таких как реактивная мезотелиальная гиперплазия или фиброзный плеврит (организующий плеврит), может быть сложно, поскольку не существует общепринятых диагностических биомаркеров для дифференциации этих двух состояний. В результате пациенты часто обращаются с заболеванием, когда они уже находятся на поздней стадии, и менее 20% пациентов могут быть успешно вылечены хирургическим путем.
Текущее исследование, однако, предполагает, что miRNA могут предоставить новые возможности для повышения точности дифференциальной диагностики между MPM и доброкачественными состояниями плевры. Таким образом, при дальнейшей валидации комбинация ISH для miRNA с иммуногистохимическим тестированием мишеней miRNA может иметь потенциал для помощи в диагностике и, следовательно, в исходе MPM.
ТЕХНИЧЕСКИЕ ДЕТАЛИ ИССЛЕДОВАНИЯ Чтобы идентифицировать и оценить микроРНК как возможные диагностические биомаркеры MPM, экспрессию 742 miRNAs в предоперационных диагностических биопсиях FFPE, хирургически удаленных образцах MPM, ранее леченных химиотерапией, и соответствующей неопухолевой плевре (NNP) от пяти пациентов. проверено с использованием платформы на основе RT-qPCR. Четыре miRNA (miR-126, miR-143, miR-145 и miR-652) были значительно подавлены (≥2 раза) в резецированных MPM и / или не получавших химиотерапию диагностических биопсиях опухоли.
Валидация полученного профиля экспрессии miRNA была проведена на хирургически удаленных образцах ткани у 40 пациентов с МПМ и 14 сопоставимых с пациентом образцах NNP, а также на 12 предоперационных диагностических биопсиях и пяти неопухолевых реактивных мезотелиальных пролиферациях из-за пневмоторакса. Выполнив бинарную логистическую регрессию данных RT-qPCR для четырех miRNA, классификатор дифференцировал MPM от NNP с высокой чувствительностью и специфичностью.
Оптимальное значение логита (P) классификатора, равное 0.62 отдельных образца NNP и MPM с высокой чувствительностью, специфичностью и точностью (все ≥0.93).
Для иммуногистохимии срезы ткани FFPE подвергали окрашиванию с использованием антител к известным мишеням miR-126 LAT1 и Crk-II, оценивали с помощью световой микроскопии и оценивали с помощью полуколичественной оценки H. Хотя не было обнаружено значительных различий между образцами MPM и NNP для Crk-II, образцы MPM имели средний H-балл 2 для иммуноокрашивания LAT1, который был значительно выше, чем 0.5 средний балл для образцов NNP (P