Их исследование, опубликованное в журнале eLife, предполагает необходимость изучения альтернативных стратегий лечения ВИЧ — вируса, с которым в 2016 году жили 36,7 миллиона человек во всем мире, при этом 1,8 миллиона человек заразились впервые в том же году, согласно данным ЮНЭЙДС.В настоящее время ВИЧ неизлечим из-за сохранения латентно инфицированных клеток — клеток, в которых находится спящий вирус. Подход «шокируй и убей» к лечению инфекции включает использование агентов, обращающих латентный период (LRA), чтобы заставить инфицированные клетки снова продуцировать ВИЧ (фаза «шока»), при этом поддерживая антиретровирусную терапию (АРТ), чтобы предотвратить появление новых инфекции.
Эта реактивация ВИЧ приведет к прямому или косвенному уничтожению пораженных шоком клеток с помощью АРТ (также известной как «фаза уничтожения»).Однако существующие в настоящее время LRA оказались неэффективными. Команда исследователей из Института исследований старения Бака попыталась понять, почему. «Неудачу LRA можно объяснить несколькими препятствиями, но самой большой проблемой на сегодняшний день является наша неспособность точно определить количество клеток в латентном резервуаре ВИЧ — группе клеток, инфицированных ВИЧ, но не вызывающих новых инфекций», говорит ведущий автор Эмили Баттивелли, научный сотрудник Института Бака.
Чтобы решить эту проблему, Баттивелли разработал новый репортерный вирус ВИЧ-1 с двойной флуоресценцией, HIVGKO, для исследования способности различных LRA реактивировать ВИЧ-инфекцию в латентных клетках. Этот вирус кодирует два разных флуоресцентных белка, GFP и mKO2. GFP находится под контролем промотора ВИЧ и показывает состояние транскрипции ВИЧ (латентный или продуктивный), в то время как mKO2 находится под контролем отдельного промотора (EF1alpha) и позволяет идентифицировать инфицированные клетки (латентные и продуктивные).
Используя этот репортер, ученые обнаружили, что удивительно небольшое количество (менее 5%) латентно инфицированных клеток реактивируется LRA. Затем они провели анализ секвенирования реактивируемой и не реактивируемой ВИЧ-инфекции в латентных популяциях клеток. Это показало, что сайты, где вирус интегрируется в геном, различаются между вирусами, которые реактивируются, и вирусами, которые не реагируют на LRA.
«В совокупности эти результаты показывают, что, хотя метод« шокируй и убей »может быть полезным для реактивации и, возможно, устранения небольшого подмножества высокореактивируемых латентных геномов ВИЧ, для контроля или устранения менее легко реактивируемой популяции, выявленной как здесь, так и в настоящем, потребуются другие подходы. пациентов », — говорит старший автор Эрик Вердин, президент и генеральный директор Buck Institute.«Возможно, эту популяцию клеток следует вместо этого« заблокировать и заблокировать »с помощью агентов, способствующих латентности, как предполагали предыдущие исследования.
Для функционального лечения нереактивируемые латентные геномы ВИЧ, безусловно, были бы предпочтительнее, чем пожизненная хроническая активная инфекция».